凍結薄切標本におけるNADH-TR（NADH-テトラゾリウム還元酵素）染色についてご紹介いたします。

NAD（Nicotinamide Adenine Dinucleotide）には、酸化型（NAD⁺）と還元型（NADH）があり、さまざまな脱水素酵素の補酵素として機能しています。NADH-TR染色では、NADHを基質として、ジアホラーゼ活性（NADH依存性酸化還元酵素活性）により、水溶性のNBT（Nitro-Blue Tetrazolium）が還元され、青色の非水溶性物質（formazan顆粒）として沈着することで発色します。筋線維内では、主にミトコンドリアを中心とした酸化系酵素活性の高い領域が強く染色されます。

NADH-TR染色は、筋線維の代謝様式を評価するための染色法です。免疫染色によるMyosin Fast/Slow染色が、筋線維を構成するミオシン重鎖の種類を識別するのに対し、NADH-TR染色はミトコンドリアに関連する酸化系酵素活性などの代謝機能を反映します。一般に、濃染（青～紺）を示す筋線維は酸化系代謝が相対的に優位であり、淡染（白～淡青）を示す筋線維は解糖系代謝が優位である傾向があります。

弊社では、同一標本においてNADH-TR染色とMyosin Fast/Slowの蛍光二重免疫染色を行うことが可能です。両染色を組み合わせることで、筋線維タイプの補助的な判別が可能になります。

参考文献
・水口國雄ら. 染色法のすべて. 医歯薬出版株式会社. 2011; p.83-84.
・西野一三. 筋病理の基本. 臨床神経学. 2011; 51(9): p669–676.
https://neurology-jp.org/Journal/public_pdf/051090669.pdf
・Talbot JC, Maves L. Skeletal muscle fiber type: using insights from muscle developmental biology to dissect targets for susceptibility and resistance to muscle disease. Wiley Interdiscip Rev Dev Biol. 2016; 5(4): p518–534.

Keyword：凍結切片、NADH-TR、筋線維、遅筋、速筋、Myosin Fast、Myosin Slow

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